Кал на хеликобактер пцр как сдавать

Частые недомогания со стороны пищеварительного тракта, такие как изжога, отрыжка, тяжесть в животе после еды или тошнота, могут свидетельствовать о присутствии в организме Хеликобактер Пилори (Helicobacter pylori). Жизнедеятельность болезнетворного агента в желудке и двенадцатиперстной кишке вызывает серьезные заболевания, которые требуют длительного и дорогостоящего лечения.

Для того, чтобы избежать нежелательных последствий, необходимо своевременно выявлять и обезвреживать опасного врага. В медицинских учреждениях можно сделать анализ кала на Хеликобактер Пилори и таким образом удостовериться в наличии или отсутствии инфекции.

Что представляет собой хеликобактерия

Тело грамотрицательной бактерии имеет форму спирали с четырьмя или шестью жгутиками, которые помогают ей двигаться в густой среде — слизистом геле, покрывающем стенки органов ЖКТ. Она паразитирует в желудке и двенадцатиперстной кишке, которые анатомически связаны между собой. Больше всего колоний Хеликобактер Пилори размещается в районе привратника, соединяющего эти два органа. Исходя из этих характеристик, микроорганизм назвали спиралевидной бактерией (helicobacte), обитающей в привратнике (pylori).

Микробы не могут жить и размножаться в кислой среде желудка, так как их тела не защищены от действия соляной кислоты. Хеликобактер Пилори является исключением из правил. Для жизнедеятельности бактерии нужна именно кислая среда, поэтому она не живет в кишечнике, как большинство видов грамотрицательных патогенов. Более того, в кишечном тракте мало кислорода, много разрушающих ферментов поджелудочной железы и желчи, что неблагоприятно сказывается на жизнеспособности микроорганизма.

Бактерия выделяет особый фермент — уреазу. Наличие этого фермента в желудке, а соответственно и хеликобактерию, можно быстро выявить с помощью уреазного теста. Он выполняется в момент проведения гастроскопии и позволяет получить достоверный результат в течение нескольких минут. Кал на Хеликобактер Пилори изучается более длительное время, но такой анализ имеет свои преимущества.

Коварство патогена заключается в том, что он незаметно разрушает органы изнутри. После заражения организма отсутствует какая-либо симптоматика, указывающая на инфекцию. Все негативные явления возникают лишь тогда, когда в желудке или двенадцатиперстной кишке развиваются болезни — гастрит, дуоденит, язва.

Другой неприятной особенностью микроорганизма является его способность трансформироваться в кокковую (шарообразную) форму, напоминающую споры. Это происходит в том случае, если патоген попадает в неблагоприятную среду, например, в момент терапии антибиотиками. В таком состоянии бактерия становится менее уязвимой и способна надолго затаиться в организме.

Кому рекомендуется

Хеликобактер Пилори считается одной из самых распространенных инфекций у людей. Чаще всего ее диагностируют у пациентов старше сорока лет. Люди могут быть носителями бактерии и даже не догадываться об этом из-за отсутствия симптомов. Не всегда носительство представляет серьезную угрозу для здоровья, однако при любом гастроэнтерологическом заболевании делаются анализы кала или крови на выявление Хеликобактер Пилори.

Медицинское обследование стоит пройти при наличии следующей симптоматики:

• частой изжоги, отрыжки;
• регулярных нарушений стула (диареи или запоров);
• тошноты, ощущения тяжести после еды;
• отвращения к белковой пище (мясу, птице);
• повышенного газообразования;
• болей в проекции желудка;
• устойчивого снижения веса;
• дисфагии (затруднений при глотании).

Так как патоген передается через слизь или слюну, то инфекция быстро распространяется внутри семьи через пользование общей посудой и предметами личной гигиены. Если у одного члена семьи выявлена хеликобактерия, то остальным близким родственникам тоже рекомендуется пройти соответствующее обследование.

Как подготовиться к сдаче анализа

Прежде чем сдать кал на Хеликобактер Пилори, необходимо ознакомиться с правилами подготовки к анализу и сбора материала. Это могут быть устные указания от врача, либо напечатанные инструкции, которые обычно выдают частные клиники.

Общие рекомендации сводятся к следующему:

• за месяц до исследования следует исключить прием антибиотиков, а за трое суток — слабительных средств;
• в течение трех дней до анализа нельзя употреблять грубую клетчатку и красящие продукты;
• собирать кал нужно в специальную емкость (можно взять в клинике или купить в аптеке);
• следует брать материал из трех точек, где нет крови, слизи, гноя или мочи;
• необходимо доставить кал в лабораторию в течение двух часов после дефекации;
• повторный анализ на эффективность лечения нужно сдавать через месяц после приема антибактериальных препаратов.

Анализ кала на Хеликобактер Пилори: обзор методик и оценка результатов

Существуют разнообразные способы выявления патогена. Они отличаются по исследуемому материалу, методу лабораторного исследования, точности, информативности. Немаловажное значение так же имеет ценовой фактор, ведь не каждый человек может заплатить за анализ требуемую сумму. Некоторые методики применяются только в дорогостоящих клиниках, но это не значит, что пациенты с низким доходом не смогут получить необходимую медицинскую помощь в данном вопросе.

Наименее затратным, и в то же время достаточно информативным является анализ кала на Хеликобактер Пилори. Больному не нужно лично приходить в лабораторию, необходимо лишь своевременно доставить туда материал для исследования. Этот пункт особенно важен для родителей маленьких детей, так как малыши часто беспокоятся при посещении незнакомых учреждений.

Еще одним достоинством этого анализа является простота и безболезненность процедуры сбора материала. После испражнения нужно просто положить кал в чистую емкость и отнести в клинику. В других исследованиях пациенту могут прокалывать вену или вводить в пищеварительный тракт дуодендальный зонд.

Различают три метода анализа кала на Хеликобактер Пилори:

• бактериологический посев;
• иммунологическое исследование;
• полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Способ бактериологического посева

Классический способ выявления патогенных микроорганизмов — посев на питательной среде. Анализ кала на Хеликобактер Пилори этим методом считается наиболее сложным по ряду причин:

• при посеве необходимо исключить доступ кислорода к питательной среде;
• в кале редко присутствуют активные спиралевидные бактерии, а кокковые формы не распознаются;
• реакция на чувствительность к антибиотическому веществу может быть неточной;
• анализ делается не менее недели.

В данном случае бактериологический посев считается наименее точным методом исследования.

Иммунологическое исследование

Этот вид анализа кала на хеликобактер хилари основан на взаимодействии готовых (помеченных специальными метками) антител с антигеном (биоматериалом). При наличии положительной реакции (комплекс антиген-антитело) специалист может диагностировать инфекцию. Метод подходит для обнаружения любой формы бактерии. Результаты исследования сообщаются пациенту уже на следующий день.

Такой анализ назначают на первичном этапе обследования, до проведения инструментальной диагностики. Он не является затратным и прост в выполнении.

Полимеразная цепная реакция

Молекулярно-генетическая диагностика считается самой точной и информативной методикой выявления хеликобактерии. С помощью полимеразной цепной реакции обнаруживается специфическая ДНК патогена, поэтому даже при минимальном содержании в каловых массах бактерий, в том числе кокковых форм, можно легко выявить инфекцию.

Анализ кала на Хеликобактер Пилори методом ПЦР обычно назначают пациентам, которые имеют подтвержденные патологии в желудке или двенадцатиперстной кишке, в частности:

С помощью ПЦР можно узнать роль микроба в развитии этих болезней и правильно составить схему лечения.

Методика отличается высокой точностью — от 94 до 100%. Положительная реакция наблюдается даже при наличии всего десяти микроорганизмов. Специалисты могут выявлять и изучать различные модификации и штаммы патогена. Исследование является простым в исполнении и безопасным для пациента.

К недостаткам можно отнести относительно высокую стоимость анализа и отсутствие возможности установить чувствительность бактерии к антибиотикам.

Расшифровка анализов

При иммунологическом тесте и ПЦР могут быть лишь два результата:

• отрицательный — патоген не обнаружен;
• положительный — хелибактериоз.

В результатах бактериологического анализа, помимо перечисленных двух пунктов, добавляются сведения о чувствительности к антибиотикам, а именно:

• S — высокая;
• I — умеренная;
• R — резистентность.

Анализ кала на хеликобактер пилори – это достоверное доказательство наличия в организме человека бактерии, вызывающей язвенную и множество других болезней пищеварительного тракта человека. Такой анализ является прямым доказательством, если обнаруживается либо сам хеликобактер, либо его ДНК. Достоверность анализа самая высокая изо всех известных.

Как правильно сдавать анализ?

От правильности подготовки и сбора материала зависит результат. Присутствия человека не требуется, достаточно вовремя доставить правильно собранный материал.

Подготовка к сдаче анализа

При подготовке нужно неукоснительно соблюдать такие правила:

• сдавать кал на анализ не раньше, чем через 1 месяц после последнего приема антибиотиков;
• в течение 3-х суток, предшествовавших сбору материала, нельзя употреблять красящие продукты (чай, кофе, красные и оранжевые фрукты и овощи, куркуму, карри, соевый соус),
• исключить грубую клетчатку – капусту, редьку, редис, перловую кашу, отруби, свеклу;
• нельзя принимать лекарства, усиливающие моторную функцию кишечника – Лактулозу, Мотилиум и подобные;
• отказаться от алкоголя;
• не принимать антацидных средств (Альмагель и подобные);
• собирать материал в течение первой недели после возникновения симптомов болезни (далее концентрация хеликобактера в кале уменьшается).

Для подготовки достаточно 3-х дней. В это время желательно отказаться от всех лекарств (если сделать этого нельзя, сообщить врачу названия и дозировку). Нужно сократить употребление рыбы и мяса, готовить их на пару или варить. Лучшая еда на это время – каши и кисломолочные продукты, овощные и фруктовые пюре, слабые супы, нейтральные натуральные соки (яблочный, белый виноградный), компоты, морсы, слабый чай, отвар шиповника.

Подготовка тары

Некоторые лаборатории выдают тару для анализа, включая их стоимость в общую цену. Это лучший вариант. Емкость для кала можно приобрести в аптеке, стоимость несколько рублей. Контейнер продается в стерильном состоянии, его нельзя открывать, протирать или промывать. К крышке прикреплена пластиковая ложечка, которой материал набирается.

В самом крайнем случае можно воспользоваться стеклянной банкой с хорошо подогнанной крышкой (из-под детского питания). Банку нужно хорошо вымыть, а затем прокипятить вместе с крышкой и ложкой или другим предметом, которым будет набираться кал. Если на посуде останутся бактерии, анализ окажется неверным.

Сбор материала

Собирать материал из унитаза или памперса нельзя. Унитаз нужно накрыть чистым полиэтиленовым пакетом, а вместо памперса (ребенку или лежачему больному) подстелить клеенку. Допускается забор материала из чистого горшка.

Контейнер заполняется не более чем на одну треть, плотно закрыть крышкой. К посуде прикрепить направление или написать на этикетке (разборчиво) фамилию и имя пациента, год рождения.

Как и сколько можно хранить материал?

Контейнер с материалом доставляется в лабораторию как можно раньше, оптимально в день забора. Если возможности срочной доставки нет, допускается хранение в холодильнике не более 2-х суток при температуре не выше +4 ° С. При необходимости более длительного хранения материал однократно замораживают при температуре -20 ° С.

Методики анализа и расшифровки показателей

Биологический материал можно исследовать разными способами.

Опрос: Как вы относитесь к молочным продуктам в своем рационе?

• Ем почти каждый день, не наблюдаю никаких признаков расстройства пищеварения (29%, 1 461 Голосов)

Всего проголосовавших: 5 089

Другие способы выявления хеликобактера

При обследовании используют обычно несколько методов, чтобы окончательно убедиться в наличии или отсутствии хеликобактера:

• Дыхательный тест. Выполняется выдох в подготовленный мешочек, затем дают выпить медицинский радиоактивный углерод, через 10 или 30 минут нужно выдохнуть в другой мешочек. Обнаруживает присутствие хеликобактера в самых малых количествах.
• Быстрый уреазный тест желудочного биоптата. Основан на том, что бактерия выделяет уреазу, расщепляющую мочевину на аммиак и СО 2 . Во время эндоскопического осмотра берут 4 биоптата с разных участков желудка, помещают в ячейки CLO-теста. Чем больше хеликобактера, тем быстрее меняется цвет ячейки.
• Антиген хеликобактера в кале. Частички бактериальной стенки вступают в реакцию с моноклональным антителом, от этого изменяется цвет индикатора. Выпускаются тест-кассеты для домашнего использования. По инструкции кал смешивают с растворителем (прилагается пробирка с ним), несколько капель наносят в окно кассеты. Две полоски – положительно, одна – отрицательно. Дополнительно по маркировке можно узнать, действителен ли тест.
• Гистологическое исследование биоптата. Полученный при ФГДС биоптат (5 образцов) окрашивают по различным методикам, чувствительность анализа доходит до 99%.
• Вестерн-блот. Проводят у тех, у кого обнаружены антитела к хеликобактеру методом ИФА (описано выше). Определяется количество антител каждого класса (A,G,M).

Набор диагностических тестов зависит от оснащенности лечебного учреждения. «Золотым стандартом» считается гистологическое исследование. Однако положительный результат хотя бы двух разных тестов считается достаточным для того, чтобы подтвердить присутствие бактерии.

Что делать при положительном анализе?

Как можно скорее посетить гастроэнтеролога, чтобы выяснить, нужно ли проводить эрадикацию (удаление из организма) бактерии. Это неоднозначный процесс, есть противопоказания, консультация врача необходима.

После оценки уровня здоровья врач выбирает одну из схем, утвержденных международным сообществом. В зависимости от особенностей патологического процесса используются лекарственные сочетания препаратов таких групп:

• ингибиторы протонной помпы – Омепразол, Рабепразол и другие;
• кларитромицин – антибиотик группы макролидов;
• амоксициллин – полусинтетический пенициллин;
• метронидазол – противопротозойный препарат с антибактериальной активностью;
• препараты висмута – противоязвенные, оказывающие защитное действие на слизистую желудка;
• тетрациклин – антибиотик широкого спектра действия.

В процессе лечения тесты на хеликобактер могут повторяться, чтобы отслеживать эффективность лечения.

После обнаружения и удаления бактерии язвы и другие поражения слизистой заживают полностью, а также прекращаются все вторичные нарушения – восстанавливается микрофлора, синтез витаминов и гормонов, пищеварение, снижается риск развития рака желудка.

В настоящее время язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки страдает более 10% населения развитых стран, что делает проблему диагностики данного заболевания актуальной для современного здравоохранения. Анализ кала на хеликобактер является одним из основных диагностических методов выявления ассоциации язвенной болезни верхних отделов пищеварительного тракта с наличием бактериального агента, оказывающего активное ульцерогенное действие.

Методы анализа кала на Хеликобактер пилори

В настоящее время применяется несколько самостоятельных диагностических методик выявления бактерий, ассоциированных с язвенной болезнью желудочно-кишечного тракта. Верификация наличия Хеликобактер пилори в слизистой оболочке верхних отделов пищеварительной системы позволяет с высокой долей вероятности установить правильный клинический диагноз и назначить соответствующее заболевание, а значит, адекватное лечение патологии желудка. В гастроэнтерологической практике применяются следующие виды диагностики кала на предмет наличия в нём хеликобактерии:

• Молекулярная диагностика.
• Культуральный анализ или микробиологическое исследование биологического материала.
• Иммунологические методы исследования.

Каждый из вышеописанных типов анализа кала обладает собственными положительными и отрицательными сторонами. Далее будут более подробно разобраны основные диагностические методики и сравнение их чувствительности в верификации основного диагноза.

Молекулярная диагностика

Исследование при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР) для проверки кала на наличие антигена хеликобактерии. Данный метод является одним из самых современных и высокоспецифичных. Точность и достоверность молекулярного анализа составляет от 93 до 97%, так как технология проведения данного исследования предполагает высокую чувствительность диагностических реагентов к исследуемому материалу.

Чувствительность метода полимеразной цепной реакции настолько высокая, что обнаружить возбудителя желудочно-кишечного заболевания можно ещё до развития симптоматики и развёрнутой клинической картины заболевания.

Культуральный анализ

Метод высеивания бактерий на питательных средах, или иначе – культуральная диагностика, относится к классическим диагностическим исследованиям. Посев биологического материала на питательную среду с целью высеивания хеликобактер позволяет так же, как и иммунологические и молекулярные методы, добиться высокой достоверности результатов, однако, требует кропотливого труда микробиолога, ведь на подтверждение результатов исследования уходит от 4-5 дней до нескольких недель. Столь длительный период ожидания возникает в результате необходимости выращивания колоний бактерий, находящихся в биологическом материале. Важно понимать, что рост хеликобактер на питательных средах занимает длительное время и требует кропотливого труда от микробиолога.

Иммунологические методы

К иммунологическим методам относятся иммуноферментный анализ, или ИФА, а также вестрн-блот (иммуноблот):

• Иммуноферментный анализ – это диагностическое исследование подразумевает выявление антигенных компонентов хеликобактерии в организме пациента, который обследуется. Так как организм любого живого существа, в том числе и человека, вырабатывает на любой антиген специфические иммуноглобулины или антитела, то и методика основана на их выявлении. Если клиническая картина заболевания желудочно-кишечного тракта остаётся неясной, то проводится анализ биологического материала на предмет наличия в нём антител к Хеликобактер пилори. Также иммуноферментный анализ может быть назначен с профилактической целью, если обследуемый находился в контакте с больными лицами.
• Вестрн-блоттинг – альтернатива проведению иммуноферментного анализа. Цель исследования аналогичная – выявление антител к хеликобактер, однако если при ИФА используются специальные ферменты, которые способны воспринимать специфичные комплексы антиген-антитело, то при иммуноблоттинге прибегают к методике электрфореза белков в геле. Иммуноблоттинг обладает так же, как и ИФА, высокой степенью специфичности, однако, позволяет проводить только качественный анализ, в то время как иммуноферментный анализ может показать количественные данные.

Выбор методики исследования зависит не только от желания больного, но и от материально-технического состояния лаборатории или клиники, где проходит лечение, однако, не стоит беспокоиться зря, ведь современные методы обладают примерно одинаковой достоверностью результатов.

Показания к проведению обследования

Исследование кала на наличие в нём Хеликобактер пилори проводится в случаях, когда у пациента имеется неясная картина заболевания верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Например, к таким заболеваниям можно отнести:

• Хронический гастрит.
• Рецидивирующая язвенную болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки или её злокачественное течение.
• Дуаденогастральная рефлюксная болезнь.
• Стеноз привратника желудка.

Вышеописанные заболевания могут наблюдаться у больного, как изолированно, так и в различных комбинациях. Чаще всего в клинической практике наблюдаются смешанные варианты патологии верхних отделов пищеварительного тракта.

В 80% случаев язвенная болезнь является ассоциированной с Хеликобактер пилори, таким образом, полноценная патогенетическая терапия может быть только с применением в лечении антибактериальных препаратов, которые обладают и выраженными побочными эффектами. Для того чтобы определиться с направлением консервативной терапии гастроэнтерологического больного, необходимо подтверждение или исключение бактериального поражения слизистой желудочно-кишечного тракта.

Преимущества и недостатки ПЦР-анализа

ПЦР-диагностика – самый современный диагностический метод, он позволяет определить наличие патогенного агента даже в самых ничтожных концентрациях, а результаты данных обладают самой высокой степенью специфичности. Использование полимеразной цепной реакции является высокотехнологичным процессом и требует серьёзных материальных затрат, так что наряду с высокой информативностью результатов данный диагностический метод является и очень дорогим. В диагностике хеликобактер ПЦР можно применять, но тот же самый иммуноблоттинг даст сравнимые результаты, но не потребует серьёзных материальных затрат.

Подготовка

Подготовка к проведению анализа кала на предмет наличия в нём Хеликобактер пилори требует подготовки от исследуемого пациента. За неделю или хотя бы несколько дней до сдачи анализа стоит воздержаться от употребления некоторых продуктов питания и веществ, к ним относятся:

• Красящие продукты, такие как свекла, морковь, виноград, смородина и вино.
• Продукты с большим содержанием клетчатки, например, отруби или капуста.

Также нужно отказаться от любых продуктов, которые способствуют газообразованию и усилению моторной функции желудочно-кишечного тракта.

Как и где сдать

Сдавать биологический материал, в данном случае каловые массы, необходимо в специальном контейнере или любой чистой герметичной ёмкости. Сдавать кал необходимо правильно! Для этого нужно знать несколько правил, которые не дадут испортить результаты исследования.

Материал должен быть собран сразу в ёмкость, минуя унитаз, так как в него могут попасть посторонние бактерии и вещества, такие как дезинфицирующие средства. Посторонние вещества могут испортить результат анализа кала. Количество биологического материала, достаточное для проведения полноценного исследования, составляет не менее 1/3 от контейнера объёмом в 150-200 мл.

Сбор биологического материала нужно осуществить незадолго до сдачи анализа в лабораторию. Сдать анализ можно в любое время, он не зависит от приёма пищи и времени дня.

Важно отметить, что материал должен быть как можно быстрее доставлен в лабораторию для проведения исследования, так как результативность будет прямо пропорциональна свежести материала.

Результаты исследования

Результат исследования будет зависеть от методики выявления хеликобактерии. Результат может быть отрицательным, положительным и неопределённым. Конечно же, норма анализа – отрицательный результат. Помимо этого, при проведении иммунологического анализа можно определить напряжённость иммунитета и количество специфических антител в организме больного.

Диагностика кала при помощи иммунологического или молекулярного исследования занимает не более двух дней. Как правило, лаборатория выдаёт результат на следующий день после сдачи анализа.

Отдельно стоит отметить, что проведение культурального теста в настоящее время применяется всё реже, так как данный диагностический метод занимает длительный промежуток времени.

Расшифровка результата даёт понять лечащему врачу, в каком направлении необходимо строить лечебный план, и есть ли необходимость в антибактериальной терапии.